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    ?有趣的是，vegf    和基质硬化都有效地导致血管通透性。为了进一步表征抗    ras    药物对血管完整性的作用，我们通过对紧密连接蛋白    zo-1（封闭小带1）进行免疫染色分析了它们对ec    连接稳定性的影响。虽然建议贝伐单抗治疗导致消除未成熟血管，但我们观察到贝伐单抗对    zo-1    紧密连接没有变化（图a-b）。与之前在其他疾病模型中的发现一致，即增加基质刚度可增强内皮通透性，我们还观察到    zo-1    覆盖率与    crc    lm    的组织硬度之间存在负相关，表明在更硬的    lm    (图c)。在接受抗    ras    药物治疗的    bev-患者中，我们还观察到    ec    中    zo-1    覆盖率的增加，表明单独的抗    ras    足以改善内皮连接稳定性（图a，d）。然而，在联合治疗（bev+和抗    ras）中，对连接稳定性的影响大大增强（图a，e）。

    ?    klf2    是一种剪切应力响应转录因子，其表达随层流剪切应力增加，是灌注的标志。抗血管生成治疗没有改变内皮细胞中    klf2    的表达（图f-g）。然而，klf2    表达与组织刚度呈负相关，表明基质硬度增加会损害灌注（图h）。在未接受贝伐珠单抗治疗的患者中，klf2    表达未因抗    ras    治疗而改变（图f-i），但在抗    ras    和贝伐单抗治疗的患者中显着更高（图f、j）。

    10、内皮细胞yap/taz    是受    lm    基质硬度和vegf    调节的中枢

    ?然后我们使用ec    核标记    erg1    分析了患者样本中的    ec    yap/taz    激活状态。抗血管生成治疗导致    yap/taz    ec    硬度降低（图k，l），表明    vegf    信号是    lm    中    ec    中    yap/taz    易位所必需的。然而，与非高血压患者以及接受贝伐珠单抗和非    ras    药物治疗的患者相比，贝伐珠单抗治疗同时停用    vegf    的同时降低僵硬度降低了核    yap/taz    强度（图k，n），与    ras    抑制的类型无关。最相关的是，我们观察到接受    lm    切除术并在疾病过程中接受抗血管生成治疗并同时进行抗    ras    治疗的患者的    os    显着延长。这通过多变量    cox    回归分析得到证实（图o）。综上所述，抗血管生成治疗联合ras抑制显着抑制内皮    yap/taz    激活和转移性血管生成。

    ?研究优点：

    1肿瘤受到其微环境的机械特性的影响。利用患者样本和原子力显微镜，我们发现肝转移瘤的组织硬度高于原发性结直肠肿瘤。高度活化的转移相关成纤维细胞增加了组织的硬度，从而增强了血管生成和抗血管生成治疗的抵抗力。

    2针对肾素-血管紧张素系统的药物通常用于治疗高血压，可抑制成纤维细胞收缩和细胞外基质沉积，从而减少肝转移瘤硬化，并增加贝伐单抗的抗血管生成作用。

    3接受贝伐单抗治疗的患者在同时接受肾素-血管紧张素抑制剂治疗时存活时间延长，这突显了调节治疗方案的机械微环境的重要性。

    ?研究局限性：

    1对于接受贝伐单抗治疗的结直肠癌和肺癌患者，贝伐单抗治疗本身就能诱发高血压。在该研究中并未对与贝伐单抗无关的高血压及贝伐单抗导致的高血压进行区分。


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